IGF-1 LR3 (Long R3 IGF-1) — 1 mg

Langwirksames Analogon des humanen IGF-1 (83 Aminosäuren) mit stark verringerter Affinität zu den IGFBP-Bindungsproteinen, wodurch es sich als Zellkultur-Werkzeug für die Untersuchung der IGF-1R-Signalübertragung, der Proliferation und des Zellüberlebens eignet. Fläschchen mit 1 mg, lyophilisiertes Pulver, Reinheit ≥ 99 % HPLC, durch Drittanalyse bestätigt. Reagenz ausschließlich für die Laborforschung; jede Anwendung am Menschen oder am Tier ist ausgeschlossen.

Untersuchte Forschungsbereiche

• Zellproliferation und Zelldifferenzierung
• IGF-1R-Signalübertragung (PI3K/Akt, MAPK)
• Zellkultur in definiertem Medium

Technische Daten

Was „Long R3“ gegenüber nativem IGF-1 verändert

Die Bezeichnung ist kein Werbebegriff: Sie beschreibt zwei genau definierte Modifikationen.

Natives humanes IGF-1 umfasst 70 Aminosäuren bei rund 7,6 kDa. Die Long-R3-Variante umfasst 83: dreizehn zusätzliche Reste am N-Terminus, daher das Präfix „Long“, sowie der Austausch des Glutamats in Position 3 gegen ein Arginin, daher das „R3“.

Das entscheidende Kriterium lässt sich auf einem Analysenzertifikat überprüfen: hier ≈ 9.111 Da gegenüber ≈ 7.649 Da für natives rekombinantes IGF-1. Eine Differenz dieser Größenordnung ist keine Chargenschwankung — es handelt sich um ein anderes Molekül.

Beide Modifikationen bewirken einen starken Abfall der Affinität zu den sechs IGFBP-Bindungsproteinen; die Literatur beschreibt eine Verringerung um etwa zwei Größenordnungen. In serumhaltigem Medium oder in einer Kultur, in der die Zellen selbst IGFBP sezernieren, wird natives IGF-1 in großem Umfang gebunden, und der freie — allein rezeptoraktive — Anteil bricht ein. Das Long-R3-Analogon entgeht dieser Bindung weitgehend.

Der fast immer ausgelassene Punkt: Die Affinität zum IGF-1R selbst ist nicht erhöht, sie wird als geringfügig niedriger als die des nativen Peptids beschrieben. Der scheinbare Aktivitätsgewinn ist somit an eine Bedingung geknüpft — er besteht nur in Gegenwart von Bindungsproteinen. In einem gereinigten System ohne IGFBP ist Long R3 nicht wirksamer als natives IGF-1, entgegen der Vorstellung eines „verstärkten IGF-1“.

Untersuchter Wirkmechanismus

Zielstruktur ist der IGF-1-Rezeptor (IGF-1R), eine heterotetramere Rezeptortyrosinkinase vom Typ α₂β₂. Die Bindung an die extrazellulären α-Untereinheiten löst die Autophosphorylierung der β-Untereinheiten und anschließend die Rekrutierung von Adapterproteinen aus.

Nachgeschaltet werden zwei Zweige beschrieben: der Weg IRS-1/2 → PI3K → Akt → mTORC1, in Modellen mit Proteinsynthese und Zellüberleben assoziiert, sowie der Weg Shc → Grb2/SOS → Ras → Raf → MEK → ERK1/2, der mit proliferativen Antworten in Verbindung gebracht wird.

Bei hoher Konzentration ist eine Kreuzbindung an den Insulinrezeptor und an IR/IGF-1R-Hybridrezeptoren beschrieben: eine klassische Artefaktquelle, die sich nur durch eine vollständige Dosis-Wirkungs-Kurve ausschließen lässt.

Was die Literatur zeigt

Long R3 wird vor allem als Zellkultur-Werkzeug beschrieben: In serumfreiem, definiertem Medium dient es dort als Wachstumssupplement, wo natives IGF-1 durch IGFBP neutralisiert würde, mit höherer Aktivität bei gleicher Masse — gerade weil das System Bindungsproteine enthält.

Was die Literatur nicht zeigt:

• Zu IGF-1 LR3 existiert kein klinisches Studienprogramm am Menschen. Das Molekül ist in keiner Rechtsordnung als Arzneimittel geprüft oder zugelassen, und es liegen keinerlei Daten zu Wirksamkeit oder Sicherheit beim Menschen vor.
• Ein Arzneimittel auf Basis von rekombinantem IGF-1 existiert durchaus — Mecasermin, zugelassen bei schwerem primärem IGF-1-Mangel unter strenger ärztlicher Überwachung. Dabei handelt es sich um natives humanes IGF-1 mit 70 Aminosäuren, ein von diesem Reagenz verschiedenes Molekül: Seine Daten lassen sich nicht auf das hier angebotene Produkt übertragen, das kein Arzneimittel ist.
• Die IGF-1R-Achse wird in der experimentellen Onkologie als proliferativer Signalweg untersucht, was eine Handhabung durch qualifiziertes Personal erfordert und keinerlei Übertragung auf Anwendungen erlaubt.
• Die Halbwertszeit im Kreislauf wird als länger als die des freien nativen IGF-1 beschrieben, doch die veröffentlichten Werte schwanken je nach Spezies; ein Konsenswert lässt sich nicht angeben.

Rekonstitution: ein Rechenbeispiel

Das Fläschchen enthält 1 mg. Die Rekonstitution erfolgt mit bakteriostatischem Wasser, das Benzylalkohol enthält und daher mehrfache Entnahmen zulässt.

Mit 2 mL bakteriostatischem Wasser in einem Fläschchen zu 1 mg:

• resultierende Konzentration: 1 mg ÷ 2 mL = 0,5 mg/mL, also 500 mcg/mL;
• auf einer U-100-Spritze entspricht 1 mL 100 IE der Skala, somit 10 IE der Skala = 0,1 mL = 50 mcg;
• das Fläschchen liefert 20 Entnahmen zu je 10 IE.

Der häufigste Stolperstein: Das Wasservolumen verändert niemals die Produktmenge im Fläschchen. Eine Rekonstitution mit 1 mL statt 2 mL ergibt 1 mg/mL statt 0,5 mg/mL — dieselbe Gesamtmasse in einem halb so großen Volumen. Nur das zu entnehmende Volumen ändert sich.

Um ein anderes Volumen oder eine andere Spritzengröße zu prüfen, rechnet unser Rekonstitutionsrechner direkt und zeigt die zu entnehmende Skalenmarkierung an.

Zu beachtende Handgriffe: das Lösungsmittel langsam an der Fläschchenwand entlang zugeben, ablaufen lassen, dann sanft schwenken. Weder kräftiges Schütteln noch Vortexen — Scherkräfte denaturieren Proteine. Manche In-vitro-Protokolle schreiben ein anderes Lösungsmittel vor, etwa einen verdünnten sauren Puffer: In diesem Fall hat das Protokollblatt Vorrang.

Lagerung

Das lyophilisierte Pulver wird bei -20 °C oder darunter gelagert, vor Licht und Feuchtigkeit geschützt. Ungeöffnet und so gelagert ist das Lyophilisat über mehrere Jahre stabil.

Nach der Rekonstitution Lagerung bei 2–8 °C, vor Licht geschützt: Der Referenzzeitraum beträgt 28 Tage. Für eine längere Aufbewahrung ist das Aliquotieren in gefrorene Fraktionen wiederholten Einfrier-Auftau-Zyklen am Hauptfläschchen vorzuziehen.

Häufige Fehler im Labor

• Long R3 als universell „verstärktes IGF-1“ behandeln. Der Vorteil besteht nur in Gegenwart von IGFBP; im gereinigten System wird die Affinität zum IGF-1R als geringfügig niedriger als die des nativen Peptids beschrieben.
• Es mit nativem rekombinantem IGF-1 verwechseln. 83 gegenüber 70 Aminosäuren, ≈ 9.111 Da gegenüber ≈ 7.649 Da: Die Masse im COA genügt zur Unterscheidung, und die Daten des einen gelten nicht für das andere.
• Bei hoher Konzentration ohne Dosis-Wirkungs-Kurve arbeiten. Die Kreuzbindung an den Insulinrezeptor macht die Zuordnung des Signals allein zum IGF-1R unsicher.
• Sehr stark verdünnen ohne Trägerprotein. Ein Protein von ~9 kDa adsorbiert an Kunststoff und Glas, woraus ein unbemerkter Titerverlust entsteht.
• Steriles Wasser für ein Fläschchen mit Mehrfachentnahme verwenden, vortexen oder wiederholt einfrieren. Jeder dieser Handgriffe zerstört einen Teil des Materials.